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環(huán)境微生物監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

發(fā)布時間:2019-03-08 08:06
作者:格瑞戴西


(一)監(jiān)測指征

1、感染暴發(fā)或感染流行時,懷疑與環(huán)境因素有關(guān)時。

2、監(jiān)測潛在的危險環(huán)境狀況,證明有危險的病原體存在或證明危險的病原體已被成功清除。

3、當(dāng)某項感染控制措施改變時,評估其效果;或者根據(jù)規(guī)范要求,儀器設(shè)備或系統(tǒng)啟用時監(jiān)測。

4、目標(biāo)性監(jiān)測的需要。

5、循證醫(yī)學(xué)證據(jù)支持。


(二)空氣監(jiān)測(沉降法)

1、采樣時間:消毒處理后、進(jìn)行醫(yī)療活動之前。

2、采樣高度:距地面垂直高度80~150cm。

3、采樣點設(shè)置

1)非潔凈房間:室內(nèi)面積≤30㎡,在對角線上設(shè)里、中、外3點。里、外兩點位置各距墻1m;室內(nèi)面積>30㎡,設(shè)東、西、南、北、中5點。其中東、西、南、北4點均距墻1m。將9cm直徑普通營養(yǎng)瓊脂平板放置各采樣點,采樣時將平皿打開,扣放在平皿旁,暴露規(guī)定時間后,蓋上平皿蓋及時送檢。

2)潔凈房間:清潔房間在空態(tài)或靜態(tài)條件下,根據(jù)房間的不同清潔級別進(jìn)行布點,操作按照GB/50333—2002。9cm直徑普通營養(yǎng)瓊脂平板在采樣點暴露30min后送檢培養(yǎng)。

4、采樣注意事項

1)采樣前,關(guān)閉門窗,消毒后在無人走動的情況下,靜止10 min后采樣。

2)采樣人員做好手部衛(wèi)生,佩戴口罩、帽子等個人防護(hù)裝備。

3)平皿蓋打開順序應(yīng)先內(nèi)后外;手臂及頭不可越過培養(yǎng)皿上方;行走及放置動作要輕,盡量減少對空氣流動狀態(tài)的影響;平皿蓋應(yīng)扣放,以防污染。

4)采樣結(jié)束后,由外向內(nèi)合上平皿蓋。

5)采樣完畢的培養(yǎng)皿應(yīng)及時送達(dá)細(xì)菌室。

5、細(xì)菌室檢測

1.培養(yǎng)皿在37℃培養(yǎng)48h后,進(jìn)行菌落計數(shù)和致病菌檢驗。

(1)普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的配制按照GB/—2003;

(2)菌落計數(shù)方法按照2012年8月1日實施《醫(yī)療機構(gòu)消毒技術(shù)規(guī)范》要求:沉降法按平均每皿的菌落數(shù)報告:cfu/(皿.暴露時間);

(3)致病菌檢驗:溶血性鏈球菌檢驗按照GB/—2003,沙門菌檢驗按照CB/—2003,銅綠假單胞菌檢驗按照GB/—1987,金黃色葡萄球菌檢驗按照CB/—1987。

6、結(jié)果判斷:

1)潔凈手術(shù)部和其他潔凈場所:空氣中的細(xì)菌菌落總數(shù)要求應(yīng)遵循GB/50333規(guī)定。

2)非潔凈手術(shù)室、非潔凈骨髓移植病房、產(chǎn)房、導(dǎo)管室、新生兒室、器官移植病房、燒傷病房、重癥監(jiān)護(hù)病房、血液病病區(qū)空氣中的細(xì)菌菌落總數(shù)≤4cfu/15min。

3)兒科病房、母嬰同室、婦科檢查室、人流室、治療室、注射室、換藥室、輸血科、消毒供應(yīng)中心、血液透析中心(室)、急診室、化驗室、各普通病室、感染疾病科門診及病房空氣中的細(xì)菌菌落總數(shù)≤4cfu/5min。


(三)物體表面監(jiān)測

1、采樣時間:

1)消毒處理后4h內(nèi)。

2)懷疑與醫(yī)院感染暴發(fā)有關(guān)時。

2、采樣方法

被采樣本面積<100c㎡取全部表面;如采樣面積≥100c㎡,連續(xù)采樣4個位置(不可有重疊),每個位置采5cm×5cm的大小,用浸有無菌生理鹽水的棉拭子1支,在規(guī)格板內(nèi)橫豎往返均勻涂擦各5次,并隨之轉(zhuǎn)動棉拭子,將棉拭子投入10ml無菌生理鹽水試管內(nèi);不規(guī)則的物體表面,用棉拭子直接涂擦,采樣面積≥30c㎡

3、實驗室檢驗

1)取1mL傾注培養(yǎng),平行雙份。37℃培養(yǎng)48h,進(jìn)行菌落計數(shù)和致病菌檢驗。普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的配制按照GB/T4789.28—2003;菌落計數(shù)方法按照(3B/T7918.2—1987;致病菌檢驗與空氣監(jiān)測相同。

2)計算公式:

A、規(guī)則物體表面:細(xì)菌總數(shù)(cfu/c㎡)=(平均每皿菌落數(shù)×洗脫液稀釋倍數(shù))/采樣面積(c㎡。)

B、小型物體表面:用CFU/件表示。

4、結(jié)果判斷:參照2012年8月1日實施《醫(yī)療機構(gòu)消毒技術(shù)規(guī)范》。

1)潔凈手術(shù)部、其它潔凈場所、非潔凈手術(shù)部、非潔凈骨髓移植病房、產(chǎn)房、導(dǎo)管室、新生兒室、器官移植病房、燒傷病房、重癥監(jiān)護(hù)病房、血液病病區(qū)物體表面細(xì)菌菌落總數(shù)≤5cfu/cm2.

2)兒科病房、母嬰同室、婦科檢查室、人流室、治療室、注射室、換藥室、輸血科、消毒供應(yīng)中心、血液透析中心(室)、急診室、化驗室、各普通病室、感染疾病科門診及病房物體表面細(xì)菌菌落總數(shù)≤10cfu/ cm2

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